В работе изучена динамика истончения блестящей оболочки эмбриона мыши в результате процедуры вспомогательного лазерного хетчинга, проводимой на стадии бластоцисты. В качестве модельных выбраны эмбрионы мыши, предварительно подвергнутые циклу заморозки–разморозки (криоэмбрионы). Для микрохирургии оболочки использовались лазерные импульсы фемтосекундной длительности (длина волны излучения – 512 нм, длительность импульса – 100 фс, интенсивность – 2.5 ТВт/см2). Толщина оболочки измерялась перед микрохирургией на стадии бластоцисты (~Е3.5, т.е. 3.5 дня эмбрионального развития) и на стадии хетчинга (т.е. вылупления эмбриона из оболочки, ~Е5). Обнаружено, что блестящая оболочка эмбрионов контрольной группы (криоэмбрионы, не подвергнутые лазерному воздействию) истончается сильнее (с 6.6 (Е3.5) до 4.9 мкм (Е5)) по сравнению с экспериментальными эмбрионами после процедуры вспомогательного лазерного хетчинга (с 7.1 (Е3.5) до 6.4 мкм (Е5)). И в первом, и во втором случаях изменения толщины оболочки являлись статистически значимыми. Полученные результаты сопоставлены с данными для “свежих” эмбрионов, не подвергавшихся процедуре криоконсервации. Выраженного эффекта “затвердевания” блестящей оболочки у криоэмбрионов по сравнению со “свежими” эмбрионами не выявлено. Применение процедуры вспомогательного лазерного хетчинга криоэмбрионов позволило повысить вероятность успешного хетчинга по сравнению с эмбрионами контрольной группы с 38.5 до 52.5%.
В настоящей работе диссекция блестящей оболочки эмбриона мыши осуществлялась с использованием фемтосекундных лазерных импульсов инфракрасного диапазона спектра (длина волны излучения – 1028 нм, длительность – 280 фс, частота следования импульсов – 2.5 кГц). Работа посвящена исследованию c помощью оптической микроскопии зависимости ширины надреза D, формируемого лазерным излучением, от энергии E лазерных импульсов и скорости υперемещения луча. Впервые показано, что одно и то же значение ширины надреза может быть получено при различном сочетании указанных параметров. Предложено аналитическое выражение для описания зависимости ширины формируемого надреза на блестящей оболочке D(E, υ) при заданной частоте следования лазерных импульсов 2.5 кГц. Определены границы применимости функционала D(E, υ), которые охватывают значительный диапазон скорости лазерного луча 0.25 ≤ υ ≤ 100 мкм/с, а также перекрывают диапазон энергий от минимальных значений, соответствующих началу появления надреза, вплоть до возникновения оптического пробоя водной среды 115 ≤ E≤ 190 нДж. Полученные результаты позволяют получить быструю оценку ширины планируемого надреза для любой комбинации параметров E и υ при микрохирургии блестящей оболочки эмбриона в рамках различных вспомогательных репродуктивных технологий.
Объектом исследования в настоящей работе являлась блестящая оболочка эмбриона мыши, подвергнутого процедурам витрификации и разморозки (крио-эмбрион). Диссекция оболочки осуществлялась лазерными импульсами фемтосекундной длительности видимого диапазона спектра (длина волны излучения – 514 нм, длительность – 280 фс, частота следования импульсов – 2.5 кГц). Исследована зависимость ширины надреза D , формируемого лазерным излучением на блестящей оболочке эмбриона, от интенсивности I лазерных импульсов и скорости υ перемещения луча. Полученные результаты были сопоставлены с данными для эмбрионов, не подвергавшихся процедуре криоконсервации («свежие» эмбрионы). Примененный статистический метод анализа (ANCOVA, или ковариационный анализ) продемонстрировал отсутствие статистической разницы в значениях зависимостей D ( I , υ ) для двух групп: свежих и крио-эмбрионов. Таким образом, параметры лазерного излучения для микрохирургии свежих эмбрионов подходят для диссекции блестящей оболочки эмбрионов, подвергнутых процедурам витрификации и разморозки.
Фотобиостимуляция сперматозоидов или световая активация сперматогенных клеток представляют собой перспективный метод, направленный на увеличение активности и жизнеспособности сперматозоидов. Этот процесс, основанный на воздействии света определенного спектрального диапазона, способен улучшить метаболические процессы внутри сперматозоидов, повышая их подвижность и эффективность оплодотворения. Эффективность фотобиостимуляции объясняется способностью света активировать фотоселективные молекулы, вовлеченные в энергетический обмен мужских половых клеток. В настоящей статье представлен аналитический обзор научных публикаций, касающихся положительного, нулевого и отрицательного эффекта воздействия света на сперматозоиды. Проанализированные исследования показывают, что использование излучения лазера или светодиодов различной длины волны может значительно улучшить показатели как морфологии, так и подвижности сперматозоидов. Анализ литературы, проведенный с использованием закона Арндта—Шульца, позволил определить оптимальные значения параметров облучения. Технология имеет потенциал не только в лечении мужского бесплодия, но и в улучшении клинических результатов экстракорпорального оплодотворения.
Индексирование
Scopus
Crossref
Высшая аттестационная комиссия
При Министерстве образования и науки Российской Федерации